[動物實驗] - 蛋白質組學服務

實驗收費標準：

服務介紹：

    蛋白質組學（Proteomics） 一詞，源于蛋白質（Protein） 與 基因組學（Genomics） 兩個詞的組合，是大規(guī)模、高通量地研究一個細胞、組織或物種中表達的全套蛋白質的學科。基于近年來質譜技術的普及和發(fā)展，蛋白質組學已經(jīng)成為蛋白質研究領域的重要部分。蛋白質組學技術可以對生物樣本中蛋白質進行大規(guī)模鑒定和定量，進而從高通量數(shù)據(jù)中挖掘有用信息，為研究提供線索和方向。

　   目前蛋白質組學領域最CHENGSHU的即為（shotgun），即從樣品中提取蛋白質，經(jīng)過還原、烷基化、酶解等步驟變?yōu)殡亩位旌衔铮俳?jīng)過電噴霧進入質譜中掃描，得到質譜圖，通過軟件和數(shù)據(jù)庫進行解析，得到相應的蛋白質信息。     主要設備：質譜儀 Thermo Q Exactive / AB Secix 5600+     蛋白質組學是在大規(guī)模水平上研究蛋白質的特征，如表達水平，蛋白間互作，翻譯后修飾，從而發(fā)現(xiàn)不同發(fā)育、生長期和不同生理、病理條件下的特點，在基礎醫(yī)學和疾病機理研究中有著重要作用。

實驗結果展示：

實驗流程：

　　樣品保存運輸

　　1、膠點/膠條樣本
　　①蛋白量大于100ng，4℃保存，冰袋運輸。
　　②收集時，用雙蒸水對膠塊進行清洗，采用干凈刀片將目的條帶區(qū)域（避免帶入空白或非目的區(qū)域）切下，裝入EP管中保存。
　　③考染膠條，需要條帶肉眼清晰可見，銀染膠條不建議進行蛋白質鑒定（銀染需專用質譜兼容試劑盒銀染）。
　　④不同條帶不建議混合處理，避免干擾。
　　⑤提供樣本時需提供膠塊考染圖和樣品取點圖。
　　2、蛋白溶液樣本
　　①蛋白質鑒定所需蛋白量至少大于10ug，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。
　　②定量蛋白質組學所需蛋白量大于100ug，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。
　　③修飾蛋白質組學所欲蛋白量大于5mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。
　　④建議測定蛋白濃度后，液氮速凍，避免蛋白降解，另外需要告知蛋白溶液的緩沖液成分和濃度，方便實驗室收到后進行后續(xù)處理。
　　⑤樣本若為IP實驗后磁珠-抗體-蛋白復合物，注意不要加入loading buffer，應采用wash buffer清洗后，離心去掉上清，重復三次，再使用PBS沖洗磁珠三次，去上清，收集磁珠沉淀。
　　3、細胞樣本
　　①細胞量1x107個，收集細胞沉淀，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。
　　②收集時，用預冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。
　　4、血清樣本
　　①樣本量500uL，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。
　　②樣本應盡量避免溶血。
　　5、血漿樣本
　　①樣本量500uL，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。
　　②樣本應盡量避免溶血。
　　6、尿液樣本
　　①樣本量2mL，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。
　　②樣品應盡量避免帶入糞便殘渣。
　    7、動物組織樣本
　　①樣本量300mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。　　
　　②收集時，用預冷PBS緩沖液沖洗表面血液，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時結冰。
　　③固定液浸泡過的樣本無法進行檢測。
　　8、植物組織樣本
　　①樣本量500mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。
　　②收集時，用預冷PBS緩沖液沖洗表面泥沙，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時結冰。　
　　③固定液浸泡過的樣本無法進行檢測。
　　9、微生物樣本
　　①樣本量干重200mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復凍融。
　　②收集時，用預冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。