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3-磷酸甘油醛含量檢測|茁彩生物

發布時間: 2025-03-04  點擊次數: 974次

3-磷酸甘油醛(3-phosphoglyceraldehyde)確實是生物體內糖原或淀粉酵解過程中的一個重要中間產物。

產生過程

在生物體內,3-磷酸甘油醛主要由果糖-1,6-二磷酸在醛縮酶的催化下產生。果糖-1,6-二磷酸的C3和C4之間的鍵在醛縮酶的作用下斷裂,生成一分子3-磷酸甘油醛和一分子磷酸二羥丙酮。隨后,磷酸二羥丙酮在丙糖磷酸異構酶的催化下轉化為另一分子3-磷酸甘油醛,以便進一步進行酵解。

 

在酵解過程中的反應

在糖酵解途徑中,3-磷酸甘油醛參與了兩個關鍵反應:

  1. 氧化反應:在NAD+和H3P04的存在下,3-磷酸甘油醛由3-磷酸甘油醛脫氫酶催化生成1,3-二磷酸甘油酸。

  2. 后續反應:1,3-二磷酸甘油酸會進一步經過磷酸甘油酸激酶、磷酸甘油酸變位酶、烯醇化酶和丙酮酸激酶等酶的催化,最終生成丙酮酸,并伴隨ATP的生成。

生物學意義

3-磷酸甘油醛在由糖轉化為生物能的反應以及肝內各種單糖間相互轉化中具有十分重要的生物學意義。它是連接糖酵解途徑上下游的關鍵節點,對于維持生物體內的能量平衡和糖代謝穩態至關重要。

與果糖-1,6-二磷酸的關系

果糖-1,6-二磷酸不僅是生成3-磷酸甘油醛的前體,也是糖酵解途徑中的一個重要中間產物。它在磷酸果糖激酶的催化下由6-磷酸果糖生成,并消耗一個ATP分子。果糖-1,6-二磷酸和3-磷酸甘油醛共同參與了糖酵解途徑中的多個關鍵反應,為生物體提供了必要的能量和代謝中間產物。

測定方法

酶聯法

  • 原理

  • 利用甘油-3-磷酸脫氫酶(GPDH)催化G3P與NAD?反應生成DHAP和NADH,通過檢測340 nm吸光度變化定量G3P。

  • 反應式:

  • G3P + NAD? → DHAP + NADH + H?

  • 優點:操作簡便、成本低,適用于批量檢測。

  • 缺點:易受樣本中其他脫氫酶底物(如乳酸、乙醇)干擾。

高效液相色譜(HPLC)

  • 原理:通過反相色譜柱分離,紫外檢測(210 nm)或熒光衍生化(如鄰苯二甲醛)定量。

  • 優點:特異性高,可同時檢測多種代謝物(如DHAP、乳酸)。

  • 缺點:需復雜樣本前處理,設備成本高。

質譜法

  • 原理:液相色譜-質譜聯用(LC-MS/MS),多用于代謝組學研究。

  • 優點:超高靈敏度,可區分同分異構體(如2-磷酸甘油酸)。

  • 缺點:儀器昂貴,需專業技術支持。

 

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